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    植物超氧陰離子染色液(NBT,pH7.4)

    更新時間:2024-02-18

    簡要描述:

    產品名稱 :植物超氧陰離子染色液(NBT,pH7.4)
    產品貨號 :YXWZ5019
    產品規格 :3*100ml
    儲存條件:具體以標簽為準
    有效期:12個月
    本產品僅供科研實驗用,不做其他用途。

      免費咨詢:025-65010873

      發郵件給我們:196099363@qq.com

    產品名稱 植物超氧陰離子染色液(NBT,pH7.4)

    產品貨號 YXWZ5019

    產品規格 3*100ml             

    儲存條件具體以標簽為準

    有效期12個月                    

    背景介紹

    植物組織在脅迫環境條件下會產生多種活性氧(ROS),ROS 活性非常大且極其不 穩定,因此 ROS 的檢測通常因其最終產物而定。超氧陰離子是活性氧的一種,屬于一種含 氧自由基,能將 NBT(氮藍四唑)還原成不溶于水的藍色甲瓚化合物,從而定位組織中的 超氧陰離子。

    植物超氧陰離子染色液(NBT,pH7.4)根據上述基本原理也稱為 NBT 染色法,

    用于植物活組織中的超氧陰離子染色。一般應用于較嫩的根尖、葉片等的整體染色,染色后 有超氧陰離子聚集的部位呈藍色至深藍色。該產品僅用于科研領域,不用于臨床診斷或其他用途。

    image.png產品組成:

     

     

     

     

     

     



    自備材料: 

    1、新鮮的植物葉片或根、自來水、蒸餾水、95%乙醇

    2、超聲波、磁力攪拌器、電子天平、濾紙、照相機

    操作步驟(僅供參考)

    1、試劑準備:將 50 mg NBT 加入到 100mL 磷酸緩沖液(pH 7.4) 中充分溶解,即得 NBT染色工作液,2-8 ℃避光保存,一月內有效。注:如果較難溶解,可通過超聲、磁力攪拌等方法促溶。

    2、樣本準備:采集經脅迫(例如重金屬)的采集植物幼苗或根尖,自來水稍洗凈,置于濾紙上吸干多余水分。

    3、染色:將植物幼苗或根尖浸入 NBT 染色工作液中,常溫避光浸染 2~6 h,至陽性部位出現深藍色,其余部位為淡藍色或近無色或呈植物本身的顏色即可。(根據植物幼嫩程度。顯色程度調整染色時間)

    4、脫色:用鑷子將植物幼苗或者葉片小心取出,浸入蒸餾水中來回漂洗 3~5 次,置于濾紙上吸干多余水分后,浸入 95%乙醇中 40℃處理 3~16 h,目的是脫去植株幼苗或者葉片本身的葉綠素或者淡藍色背景,處理期間可多次更換新鮮的 95%乙醇。

    5、觀察:用鑷子取出植株幼苗或者葉片,浸入蒸餾水中來回漂洗 3~5 次,置于濾紙上吸干多余水分后,將樣本轉入適量 NBT 樣本保存液中浸泡 30 min 后,隨后可取出拍照。樣本可置于該溶液中常溫保存一周。

    注意事項:

    1、NBT 染色工作液配制好以后需2-8℃避光保存,一月內使用。存放時間過久,會影響顯色。

    2、因任何外在因素都可能刺激植物應激產生超氧陰離子,因此植物樣本需要新鮮采集,并盡快完成染色。建議做陰性及陽性空白對照組。

    3、樣本染色完成后盡快拍照保存結果。

    4、染色和脫色步驟也可參考如下建議操作:組織放入染液中,抽真空,-0.1MPa 保持負壓20~30min,再于室溫下靜置染色 60min,棄染色液;加入 95%乙醇,于 70~80℃水浴鍋脫色,每隔 10min 換一次 95%乙醇,待樣品綠色全部褪去后可停止脫色。

    5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

     

    植物超氧陰離子染色液(NBT,pH7.4)

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